人觸珠蛋白ELISA試劑盒
介紹
人結合珠蛋白是一種主要由肝臟產生的急性期糖蛋白。它由兩個a亞基 (MW 16-23 kDa) 和兩個b亞基 (MW 35-40 kDa) 組成。觸珠蛋白可以與溶血紅細胞釋放的游離血紅蛋白結合,防止血紅蛋白中氧和鐵反應形成的自由基超氧化物的形成。 它還已知參與免疫調節和抗炎。在感染和炎症、肥胖、組織損傷等期間觀察到結合珠蛋白的量升高。因此,結合珠蛋白被用作檢測急性同種異體移植排斥、增殖性糖尿病視網膜病變 (PDR) 和糖尿病腎病 (DKD) 的生物標誌物。此外,在溶血性貧血期間主要觀察到低結合珠蛋白水平。
測定原理
該測定是定量夾心ELISA。微孔板預塗有抗人觸珠蛋白的兔多克隆抗體。標準品和样品被移入孔中,任何存在的人觸珠蛋白都被固定化抗體結合。洗去任何未結合的物質後,將辣根過氧化物酶 (HRP) 連接的特異於人觸珠蛋白的多克隆抗體添加到孔中。在最後一個洗滌步驟之後,加入 HRP 底物溶液,顏色與最初結合的人結合珠蛋白的量成比例。停止測定,並使用酶標儀確定孔的光密度。由於吸光度的增加與捕獲的人結合珠蛋白的量成正比,因此可以從每個測定中包含的參考曲線推斷未知樣品濃度。
檢測性能
一種。 標準曲線的典型代表
以下標準曲線僅供演示。 應為每個測定生成標準曲線。
人類
觸珠蛋白
(納克/毫升)
吸光度
(450 納米)
消隱吸光度
0
0.087
0.000
3.12
0.135
0.048
6.25
0.194
0.107
12.5
0.347
0.260
25
0.692
0.605
50
1.349
1.262
100
2.650
2.563
B. 敏感性
該測定法可測量的最低人結合珠蛋白水平為1.56 ng/mL。
C. 精度
測定內精密度(測定內的精密度)CV <5.63%。
測定間精度(測定之間的精度)CV <1%。
D. 尖峰
人結合珠蛋白的回收率為 104.4%。
E.線性
為了評估檢測的線性,含有和/或摻入高濃度人觸珠蛋白的樣品用 1×檢測緩衝液連續稀釋,以產生具有檢測動態範圍內值的樣品。
樣品稀釋
吸光度
(450 納米)
濃度 (ng/mL)
恢復 (%)
1:2
0.601
5.843
95.37
1:4
0.269
6.010
98.10
1:8
0.116
6.790
110.82