人 PM20D1 ELISA 試劑盒
介紹
PM20D1 是一種雙向 N-脂肪酰基氨基酸合酶/水解酶，可調節 N-脂肪酰基氨基酸的產生。這些代謝物是線粒體呼吸的內源性化學解偶聯劑。在一個 UCP1 獨立方式，可能通過與線粒體轉運蛋白的相互作用，它們促進質子洩漏到線粒體基質中。 PM20D1 可以通過產熱呼吸間接調節身體化學能作為熱量的消散。
測定原理
該測定是定量夾心ELISA。微孔板預先塗有針對人類 PM20D1 的多克隆抗體。標準品和样品被移入孔中，任何存在的人 PM20D1 都被固定化抗體結合。洗去任何未結合的物質後，將辣根過氧化物酶生物素標記的特異於人 PM20D1 的多克隆抗體添加到孔中。在去除任何未結合試劑的洗滌步驟後，加入鏈黴親和素-辣根過氧化物酶 (STP-HRP) 偶聯物。在最後一個洗滌步驟之後，加入 HRP 底物 (TMB) 溶液，顏色與最初結合的人類 PM20D1 的量成比例。停止測定並使用酶標儀測定孔的光密度。由於吸光度的增加與捕獲的人類 PM20D1 的量成正比，因此可以從每個分析中包含的參考曲線中插入未知樣品濃度。
檢測性能
A. 標準曲線的典型代表
以下標準曲線僅供演示。應為每組樣品測定生成標準曲線。
人 PM20D1 (p g/mL)
吸光度
(450 納米)
消隱吸光度
0
0.103
0
31.2
0.126
0.023
62.5
0.161
0.058
125
0.237
0.134
250
0.421
0.318
500
0.747
0.644
1000
1.134
1.031
2000年
2.12
2.017
B. 敏感性
該測定法可測量的人類 PM20D1的最低水平為 7.8 p g/mL。
C. 特異性
使用重組小鼠 PM20D1 蛋白進行測試時，未觀察到交叉反應或乾擾。
D. 精度
測定內精密度（測定內的精密度）
一個樣品 已知濃度是 在一塊板上測試 8 次。
樣本 平均值 (pg/mL) 標清 簡歷 （％） 1 32723.26 1145.522 3.5 測定間精度（測定之間的精度）
一個樣品 已知濃度是 在 8 個單獨的測定中進行了測試。
樣本 平均值 (pg/mL) 標清 簡歷 （％） 1 4568.75 160.22 3.5 E. 峰值和恢復
通過添加 90 µL 檢測血清樣品 樣品和 10 µL 經計算產生預期 0, 50, 400 或 800 pg/mL 穗濃度。
尖峰水平
預期的
(p克/毫升)
觀察到的
(p克/毫升)
恢復 （％）
低加標 (50 pg/mL)
49.83
47.83
95
中穗
(400 pg/mL)396.5
357.33
90.1
高峰值 (800 pg/mL)
679.83
724
106.5
F. 線性和恢復
為了評估檢測的線性，含有高濃度人PM20D1 的樣品用 1×檢測緩衝液連續稀釋，以產生具有檢測動態範圍內值的樣品。
稀釋
測量值 ( pg /mL)
預期 ( pg /mL)
恢復 （％）
1： 100
3072.46
27850.9
110.3
1： 200
30770
27850.9
110.5
PUBLICATIONS CITING THIS PRODUCT
- Yang R, Hu Y, Lee CH, Liu Y, Diaz-Canestro C, Fong CH, Lin H, Cheng KK, Pravelil AP, Song E, Lam KS. PM20D1 Is a Circulating Biomarker Closely Associated with Obesity, Insulin resistance and Metabolic Syndrome. European Journal of Endocrinology. 2021 Nov 1;1(aop).