小鼠自分泌運動因子 ELISA 試劑盒
介紹
自分泌運動因子,也稱為 ENPP-2,是一種分泌型糖蛋白,屬於胞外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶 (NPP) 家族。通常,NPP 可以從核苷酸中水解磷酸鹽。自分泌運動因子表現出獨特的溶血磷脂酶 D 活性。成熟蛋白包括兩個生長調節素 B 樣 (SMB) 半胱氨酸結結構域、一個催化結構域和一個無活性的 C 端核酸酶樣結構域,帶有一個對細胞運動很重要的 ef-hand 樣基序,以及一個涉及的區域在自分泌運動因子分泌中。在小鼠和人類中鑑定出三種同工型。大多數循環自分泌運動因子是 β 形式,含有 863 個氨基酸。自分泌運動因子有助於來自 LPC(溶血磷脂酰膽鹼)的磷脂 LPA(溶血磷脂酸)的主要細胞外來源。自分泌運動因子還可以產生少量的 1-磷酸鞘氨醇和環狀磷脂酸,它們可以拮抗 LPA 的許多致瘤特性。自分泌運動因子刺激腫瘤細胞運動並增強侵襲和轉移。它在黑色素瘤、膠質母細胞瘤、乳腺癌和肺癌、濾泡性淋巴瘤和其他癌症中上調。脂肪細胞產生的自分泌運動因子促進前脂肪細胞增殖,可能是
肥胖時升高。自分泌運動因子存在於血液、尿液、唾液、精液和腦脊液中。此外,血漿自分泌運動因子被肝臟清除,肝臟疾病時肝臟會升高。據報導,女性的正常血清或血漿自分泌運動因子濃度略高於男性,而在懷孕女性中最高。測定原理
該測定是定量夾心ELISA。微量滴定板預塗有針對小鼠自分泌運動因子的親和純化抗體。標準品和样品被移入孔中,任何存在的小鼠自分泌運動因子都被固定化抗體結合。洗去任何未結合的物質後,將生物素標記的小鼠自分泌運動因子特異性多克隆抗體加入孔中。在去除任何未結合試劑的洗滌步驟後,加入鏈黴親和素-HRP 偶聯物 (STP-HRP)。在最後一個洗滌步驟後,加入底物溶液 (TMB),顏色與最初結合的小鼠自分泌運動因子的量成比例。停止測定並使用微孔板在 450nm 處測定孔的光密度。
檢測性能
A. 標準曲線的典型代表
以下標準曲線僅供演示。 應為每個測定生成標準曲線。
小鼠自分泌運動因子 (ng/mL)
吸光度
(450 納米)
消隱吸光度
0
0.078
0
0.625
0.141
0.063
1.25
0.194
0.116
2.5
0.297
0.219
5
0.452
0.374
10
0.708
0.63
20
1.446
1.368
40
2.381
2.303
A. 敏感性
可通過該測定法測量的最低小鼠自分泌運動因子水平為0.312 ng/mL。
B. 精度
測定內精密度(測定內的精密度)CV <4.3%。
測定間精密度(測定之間的精密度)CV <5.8%。
C. 尖峰
通過添加 90 µL 檢測血清樣品 樣品和 10 µL 加標儲備溶液的計算量以產生預期的 0、5、10 ng/mL 尖峰濃度。不同水平的人自分泌運動因子的回收率下降了 80-120%。
PUBLICATIONS CITING THIS PRODUCT
- Cao H, Chung ACK, Ming X, Mao D, Lee HM, Cao X, Rutter GA, Chan JCN, Tian XY, Kong APS. Autotaxin signaling facilitates β cell dedifferentiation and dysfunction induced by Sirtuin 3 deficiency. Molecular Metabolism. 2022 Jun, 60:101493.
- Qiu H, Song E, Hu Y, et al. Hepatocyte-Secreted Autotaxin Exacerbates Nonalcoholic Fatty Liver Disease Through Autocrine Inhibition of the PPARα/FGF21 Axis. Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology. 2022 Aug:S2352-345X(22)00170-9