小鼠 PM20D1 ELISA 試劑盒
介紹
PM20D1 是一種雙向 N-脂肪酰基氨基酸合酶/水解酶，可調節 N-脂肪酰基氨基酸的產生。這些代謝物是線粒體呼吸的內源性化學解偶聯劑。以一種不依賴 UCP1 的方式，可能通過與線粒體轉運蛋白的相互作用，它們促進質子洩漏到線粒體基質中。 PM20D1 可以通過產熱呼吸間接調節身體化學能作為熱量的消散。
測定原理
該測定是定量夾心ELISA。微量滴定板預塗親和純化 抗小鼠 PM20D1 抗體。標準品和样品被移入孔中，任何存在的人 PM20D1 都被固定化抗體結合。洗去任何未結合的物質後，將辣根過氧化物酶生物素標記的小鼠 PM20D1 特異性多克隆抗體加入孔中。去除任何未結合試劑、鏈黴親和素-辣根過氧化物酶的洗滌步驟後 加入 (STP-HRP) 偶聯物。在最後一個洗滌步驟後，加入 HRP-底物 (TMB) 溶液，顏色與最初結合的小鼠 PM20D1 的量成比例。停止測定並使用酶標儀測定孔的光密度。由於吸光度的增加與捕獲的小鼠 PM20D1 的數量成正比，因此可以從每個檢測中包含的參考曲線中插入未知樣品濃度。
檢測性能
A. 標準曲線的典型代表
以下標準曲線僅供演示。應為每組樣品測定生成標準曲線。
小鼠 PM20D1 ( n g/mL)
吸光度
(450 納米)
消隱吸光度
0
0.096
0
0.312
0.128
0.032
0.625
0.161
0.065
1.25
0.23
0.134
2.5
0.371
0.275
5
0.609
0.513
10
1.116
1.07
20
2.191
2.095
B. 敏感性
該測定法可測量的小鼠 PM20D1的最低水平為 0.156 n g/mL。
C. 特異性
使用重組人 PM20D1 蛋白進行測試時，未觀察到交叉反應或乾擾。
D. 精度
測定內精密度（測定內的精密度）
在一塊板上測試了兩個已知濃度的樣品 8 次。
簡歷%：3.8%
測定間精度（測定之間的精度）
兩個已知濃度的樣品在 8 個單獨的測定中進行了測試。
簡歷%：4.9%
E. 加標和恢復
通過添加 90 µL 檢測血清樣品 樣品和 10 µL 尖峰股票。
計算溶液以產生預期的 0、1、2 或 4 ng/mL 加標濃度。
尖峰水平
預期的
（N克/毫升）
觀察到的
（N克/毫升）
恢復 （％）
低加標 (1 ng/mL)
0.94
1.04
110.7
培養基加標 (2 ng/mL)
1.91
2.21
115.8
高峰值 (4 ng/mL)
4.10
3.83
93.4
F. 線性和恢復
為了評估分析的線性，含有和/或摻入高濃度小鼠 PM20D1 的樣品用 1x 分析緩衝液連續稀釋，以產生值在分析動態範圍內的樣品。
示例 1：
稀釋
測量值 ( n g/mL)
預期 ( n g/mL)
恢復 （％）
1:2
13.69
14.37
95.3
1: 4
8.39
7.76
92.5
1:8
3.86
3.29
117.2
PUBLICATIONS CITING THIS PRODUCT
- Yang R, Hu Y, Lee CH, Liu Y, Diaz-Canestro C, Fong CHY, Lin H, Cheng KKY, Pravelil AP, Song E, Lam KSL, Xu A. PM20D1 is a circulating biomarker closely associated with obesity, insulin resistance and metabolic syndrome. Eur J Endocrinol. 2021 Dec 10;186(2):151-16