小鼠/大鼠 C-肽 ELISA 試劑盒
介紹
胰島素是一種肽類激素,對葡萄糖穩態至關重要。成熟的胰島素肽來源於胰島素原,包括由肽片段(C-肽)連接的胰島素 A 和 B 鏈。胰島素原在胰腺 β 細胞的內質網內被加工成等摩爾比例的成熟胰島素和 C 肽。小鼠 C-肽 1 是由 29 個氨基酸組成的單鏈肽,而 C-肽 2 由 31 個殘基組成。 C肽與胰島素一起分泌。
C-肽的作用被認為是保持形成三個二硫鍵的最佳構型,並且沒有生物活性,然而,最近的研究表明,C-肽可能與存在於細胞表面的 G-蛋白偶聯特異性受體結合。內皮細胞、腎微管細胞和成纖維細胞的表面,導致鈣依賴性細胞內信號的激活、Na+-K+-ATPase 的激活和 NO 合成的增強。給 DM1 患者服用 C-肽可增強骨骼肌和皮膚的血液循環,也可最大限度地減少腎小球高濾過,減少白蛋白排泄到尿液中,並改善神經功能,表明 C-肽應與胰島素一起給予 DM1耐心。據報導,結合受體的重要區域是 C 端五肽。
測定原理
該測定是雙位點ELISA。微孔板預塗有針對 C 肽的單克隆抗體。將標準品和样品加入孔中,並與生物素標記的單克隆抗體共同孵育。在去除任何未結合試劑的洗滌步驟後,加入鏈黴親和素-HRP 偶聯物 (STP-HRP) 。在最後一個洗滌步驟後,加入 TMB 底物,顏色與最初結合的 C 肽的量成比例。停止測定並使用微孔板讀數器測定孔的光密度。由於吸光度的增加與捕獲的 C 肽的量成正比,因此可以從每個分析中包含的參考曲線中插入未知樣品濃度。
檢測性能
A. 標準曲線的典型代表
以下標準曲線僅供演示。應為每個測定生成標準曲線。
C-肽 (ng/mL)
吸光度
(450 納米)
消隱吸光度
0
0.133
0
0.3
0.151
0.018
0.6
0.203
0.07
1.2
0.338
0.205
2.4
0.783
0.65
6
2.479
2.346
B.敏感性
最低水平的小鼠 C 肽 可以通過該測定檢測到的是 0.3 納克/毫升。
C. 精度
測定內精密度(測定內的精密度)CV <10%。
測定間精密度(測定之間的精度)CV <10%。