胰島素是胰島b細胞合成的一種激素。它由兩條氨基酸鏈組成，A 鍊和 B 鏈，通過硫鍵連接。 A鏈由21個氨基酸組成，B鏈由30個氨基酸組成。胰島素的分子量為 5.8KDa。

該測定是雙位點ELISA。微孔板預先塗有抗胰島素的單克隆抗體。將標準品和样品加入孔中，並與與辣根過氧化物酶 (HRP) 酶偶聯的單克隆抗體共同孵育。在去除任何未結合物質的洗滌步驟之後，加入 TMB 底物，顏色與最初結合的胰島素量成比例。停止測定並使用微孔板讀數器測定孔的光密度。由於吸光度的增加與捕獲的胰島素量成正比，因此可以從每個測定中包含的參考曲線中插入未知樣品濃度。

A.標準曲線的典型表示

以下標準曲線僅供演示。應為每個測定生成標準曲線。

B.敏感性

該測定法可測量的最低胰島素水平為 0.025 ng/mL。

C. 精度

 測定內精密度（測定內的精密度）CV <10%。

 測定間精密度（測定之間的精度）CV <10%。

D. 恢復

通過向樣品中加入不同量的胰島素來確定測定的回收率。將測定中加標樣品的測量濃度與預期濃度進行比較。 平均回收率為 92%。