快速人脂聯素 ELISA 試劑盒
介紹
脂聯素是一種專門在脂肪組織中表達的脂肪因子,具有有效的抗糖尿病、抗動脈粥樣硬化和抗炎功能。
在人類中,血清脂聯素水平降低與體重指數 (BMI) 增加、胰島素敏感性降低、血脂狀況較差、炎症增加以及發生 2 型糖尿病、高血壓和冠心病的風險增加有關。測定原理
該測定是一種夾心 ELISA,設計用於在 1 小時內定量檢測樣品中的人脂聯素。對人脂聯素具有特異性的小鼠單克隆抗體已預先包被到微量滴定板上。用戶將標準品和样品移入孔中,任何存在的人脂聯素都被固定化抗體和第二種辣根過氧化物酶 (HRP) 連接的人脂聯素特異性單克隆抗體夾在中間,該抗體與樣品共孵育。在去除任何未結合試劑的洗滌步驟之後,加入 HRP 底物溶液,顏色與最初結合的人脂聯素的量成比例。停止測定並使用酶標儀測定孔的光密度。由於吸光度的增加與捕獲的人脂聯素的量成正比,因此可以從每個測定中包含的參考曲線中插入未知樣品濃度。
檢測性能
A. 標準曲線的典型代表
以下標準曲線僅供演示。應為每組樣品測定生成標準曲線。
脂聯素 (ng/mL)
吸光度 (450 nm)
消隱吸光度
0
0.056
0
7.8
0.105
0.049
15.6
0.158
0.102
31.2
0.255
0.199
62.5
0.463
0.407
125
0.845
0.789
250
1.608
1.552
500
2.599
2.543
B. 敏感性
該測定法可檢測到的最低脂聯素水平為 7.8 納克/毫升。
C. 特異性
該測定中使用的抗體對對人脂聯素具有特異性,不會與小鼠和大鼠脂聯素以及其他測試的細胞因子或激素分子發生交叉反應,包括人抵抗素、TNFα、ANGPTL4、胰島素、瘦素和 IL6。
D. 精度
測定內精密度(測定內的精密度)CV <10%。
測定間精密度(測定之間的精度)CV <10%。
E. 恢復
通過向樣品中加入不同量的脂聯素來確定測定的回收率。將測定中加標樣品的測量濃度與預期濃度進行比較。平均回收率為 91%。