快速人胱抑素 C ELISA 試劑盒
介紹
人胱抑素 c（或胱抑素 3）由 120 個氨基酸殘基組成，屬於使溶酶體半胱氨酸蛋白酶失活的胱抑素超家族。作為一種強陽離子和低分子量 (13.4 kDa) 蛋白質，它幾乎可以自由地穿過腎小球膜，主要用作腎功能的生物標誌物。越來越多的證據表明，胱抑素 c 是比肌酐更可靠的腎小球濾過率生物標誌物 [1-3]。
除腎臟疾病外，胱抑素 c 血清水平的改變與多種類型的心血管疾病有關，包括心肌梗塞、中風、心力衰竭、外周動脈疾病和代謝綜合徵 [4-7]。它似乎也在涉及澱粉樣蛋白的腦部疾病中發揮作用，例如阿爾茨海默病 [8, 9]。此外，胱抑素 c 也已被研究作為幾種癌症形式的預後標誌物。
測定原理
該測定是一種夾心 ELISA，設計用於在 1 小時內定量檢測樣品中的人胱抑素 c。免疫板預先塗有對人胱抑素 c 具有特異性的抗體。標準品和样品被移入孔中，任何存在的人胱抑素 c 都被固定化抗體和第二種辣根過氧化物酶 (HRP) 連接的人胱抑素 c 特異性抗體夾在中間，該抗體與樣品共同孵育。在去除任何未結合物質的洗滌步驟後，加入 HRP 底物溶液，顏色與最初結合的人胱抑素 c 的量成比例。停止測定並使用微孔板讀數器測定孔的光密度。由於吸光度的增加與捕獲的人胱抑素 c 的量成正比，因此可以從每個測定中包含的參考曲線中插入未知樣品濃度。
檢測性能
一種。 標準曲線的典型代表
以下標準曲線僅供演示。應為每組樣品測定生成標準曲線。
胱抑素C (納克/毫升)
吸光度 (450 nm)
消隱吸光度
0
0.069
0
0.23
0.127
0.058
0.46
0.187
0.118
0.93
0.309
0.24
1.87
0.539
0.47
3.75
0.946
0.877
7.5
1.685
1.616
15
2.551
2.482
B. 敏感性
最低水平的人胱抑素C 該測定法可檢測到的濃度為 0.23 ng/mL。
C. 特異性
該檢測中使用的抗體對人胱抑素 c 具有特異性，不會與小鼠和大鼠胱抑素 C 以及其他細胞因子或激素分子發生交叉反應。
D. 精度
測定內精密度（測定內的精密度）
在一塊板上測試了三個已知濃度的樣品 12 次。
樣本
平均值 (ng/mL)
標準差（納克/毫升）
簡歷 （％）
1
507.3
30.1
5.9
2
377.2
23.1
6.1
3
137.4
10.8
7.9
測定間精度（測定之間的精度）
三個已知濃度的樣品在 10 個單獨的測定中進行了測試。
樣本
平均值 (ng/mL)
標準差（納克/毫升）
簡歷 （％）
1
499.3
39.0
7.8
2
377.2
23.1
6.1
3
137.4
10.8
7.9
E. 恢復
血清樣品中加入了不同量的人胱抑素 C 和 化驗。
樣本
平均回收率
範圍 ％
血清
99
94-107